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Roche_Light Cycler 480II荧光定量PCR仪主要应用于哪里?
发布时间:2019-07-22   点击次数:107次
   Roche_Light Cycler 480II荧光定量PCR仪主要应用于哪里?
  荧光定量检测系统由荧光定量PCR仪,实时荧光定量试剂,通用电脑,自动分析软件等构成。设备由荧光定量系统和计算机组成,用来监测循环过程的荧光。
  与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常化后可以设定域值水平,这就是分析荧光数据的水平。样品到达域值水平所经历的循环数称为Ct值(限制点的循环数)。域值应设定在使指数期的扩增效率为最大,这样可以获得最准确,可重复性的数据。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品,线性回归分析将产生一条标准曲线,可以用来计算未知样品的浓度。
  所谓荧光定量PCR仪技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基因,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
  Roche_Light Cycler 480II荧光定量PCR仪已经应用于基础科学研究、临床诊断、疾病研究及药物研发等领域,主要的应用在以下方面:
  1.DNA或RNA的绝对定量分析。包括病原微生物或病毒含量的检测,转基因动植物转基因拷贝数的检测,RNAi基因失活率的检测等。
  2.基因表达差异分析。例如比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异(如药物处理、物理处理、化学处理等),特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA芯片或差显结果的确证
  3.基因分型。例如SNP检测,甲基化检测等。
  随着实时Roche_Light Cycler 480II荧光定量PCR仪技术的推广和普及,该技术必然会得到更广泛的应用。
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